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HPV分型检测对宫颈细胞学阴性妇女宫颈病变诊断的价值分析
李妍1  黄成日2
1. 滨州医学院·龙口市人民医院   山东  烟台 264000
2.滨州医学院烟台附属医院妇产科  山东  烟台 264199
【摘要】：目的：对宫颈细胞学检查结果为阴性的患者进行人乳头瘤病毒（Human papillomavirus，HPV）分型检测，观察其在临床诊断中的应用价值。方法：本研究以2022年6月-2023年8月间在本院行宫颈病变筛查并病理阴性的150例女性患者为研究对象，对34名检查结果为阳性患者行阴道镜检查，并对其临床表现进行观察。结果：在本次研究的150例患者中，HPV检查的阳性率为22.67%（34/150）。经病理证实，宫颈上皮瘤变共有15例（44.12%），宫颈上皮内瘤变（Cervical intraepithelial neoplasia，CIN）Ⅰ共有12例（35.29%），CINⅡ共有3例（8.82%），CINⅢ和宫颈癌各有2例（5.88%）。在34例HPV阳性患者中，共有11例（32.35%）分型检测结果为HPV-16，有7例（20.59%）分型检测结果为HPV-18，其他11种HPV病毒则合计有16例（47.06%）。在HPV病毒中，HPV-16和HPV-18的感染率高于其他高危型。结论：HPV分型检测能有效地鉴别出分细胞学检查呈阴性患者的宫颈病变的类型，如分型结果为HPV-16或HPV-18阳性，需行阴道镜检查，以提高宫颈癌早期诊断的准确率，增强宫颈癌防治能力。
【关键词】：人乳头瘤病毒分型检测；宫颈癌；宫颈细胞学检查；宫颈上皮内瘤变；阴性
HPV分型在宫颈活检阴性者的诊断中具有重要意义，HPV感染是宫颈癌的主要原因之一^[1]。虽然大多数HPV感染能够自行清除，但部分高危型HPV感染持续存在会导致宫颈上皮发生病变，并最终可能演变为宫颈癌^[2]。宫颈癌是世界卫生组织仅推荐的一种全球癌症筛查方法，巴氏涂片法、液基细胞学法、人乳头瘤病毒脱氧核糖核酸（Deoxyribonucleic acid，DNA）测定法、肉眼观察法等方法在不同国家和地区有不同的诊断方法^[3]。传统的细胞学检测方法特异性强，灵敏度低，而HPV特异性差，假阳性率高，难以用于早期筛查^[4]。目前，HPV分型技术的发展尚处于起步阶段，针对特定的HPV基因分型的研究还很缺乏。然而，大量研究表明，HPV不同亚型的HPV感染与宫颈癌的发生发展存在一定的相关性^[5]。与HPV 16/18有关的子宫颈疾病，在较早时发展较快；与HPV 16、HPV18无关的高危型HPV有关，其从低级别损伤发展为较高程度损伤，且较晚期出现^[6]。但在年轻女性中，HPV 16、HPV18感染发展为CIN的进程很快，这使得人们对宫颈癌前病变CINⅠ、Ⅱ、Ⅲ的认识存在较大争议。初次同房后两年之内可能会出现癌前病变^[7]。HPV分型检测可以直接检测宫颈上皮细胞中的HPV感染情况，明确是否存在高危型HPV感染。与宫颈细胞学阴性结果相比，HPV分型检测更具特异性和敏感性，并且能够提供更详细的信息，有助于更准确地诊断宫颈病变^[8]。对于宫颈病变的早期诊断至关重要，因为早期的宫颈癌可以通过局部治疗获得良好的预后。HPV分型检测能够在宫颈细胞学阴性妇女中及时发现存在高危型HPV感染的患者，从而引导进一步的检查和干预措施，如宫颈组织活检或随访观察。本次研究选取本院150例女性患者作为研究对象进行探究，报告如下。
1.资料与方法
1.1一般资料
随机选取2022年6月-2023年8月间在本院行宫颈病变筛查并病理阴性的150例女性患者为研究对象，年龄23~70岁，平均（45.24±9.74）岁。纳入标准：①都有性生活史；②已婚；③无手术病史，无子宫颈锥切除术史。排除标准：①未婚；②无性生活史；③曾经做过子宫切除术或子宫颈锥切除术；④当前处于妊娠状态或月经来潮中；⑤有盆腔放射史；⑥三日内曾经冲洗过阴道或有阴道用药史。本研究由我院伦理委员会批准，所有患者签署知情同意书。
1.2方法
1.2.1细胞学检查(Thinprep cytologic test，TCT)
利用泰普公司开发的宫颈液基细胞学检测技术，对患者进行临床诊断，在检查之前，先用宫颈刷在患者的宫颈外口和宫颈管上来回刷洗，然后把含有脱落细胞的宫颈刷放在试瓶中保存。由2位或2位以上的妇科专科医生来做病理判定，判定依据是2001年制订的TBS分级标准，即：无上皮内病变或恶性病变→不典型的、意义不明确的非典型鳞状细胞→高级别或低级别鳞状上皮内病变→鳞癌→不典型、意义不明确的腺细胞→腺癌。
1.2.2 HPV-DNA检测、HPV分型检测
以下几种HPV病毒采用港龙开发的基因晶片测试技术检测：①HPV-16；②HPV-18；③HPV-31；④HPV-33；⑤HPV-35；⑥HPV-39；⑦HPV-45；⑧HPV-51；⑨HPV-52；①HPV-56；①HPV-58；2 HPV-59；3 HPV-68。在检验中，HC2的敏感性为5000copy/mL。
采用港龙生化公司的全自动样本制备和聚合酶链式反应、扩增和检测方法，对以上几种类型的病毒分别进行了检测。
1.2.3阴道镜检查
在切片中加入5%冰乙酸和卢戈氏碘液，通过阴道镜观察子宫颈上皮细胞的改变。具体的判定标准是：①CINⅠ：上皮平而白，边界不清，可见镶嵌影，可见有规律的毛细血管；②CINⅡ：结果：上皮细胞表面平坦，边缘清楚，血管扩张，形态规则，毛细血管间距增大；③CINⅢ：上皮呈灰白色，边缘清楚，血管呈螺旋状扩张，毛细血管间隔不均，不典型的血管增生，碘检查未见染色。④宫颈癌：异型血管数目繁多，表面不规则，外壁有乳头样结构。
1.3观察指标
对150例TCT阴性者HPV-DNA的阳性率进行了研究，将阴道镜下活检和病理分析相结合，对患者的病变情况进行分析，并将不同分型HPV病毒在CINⅡ及以上的感染率进行比较。
1.4统计学处理
采用SPSS19.0软件进行统计分析，计量资料采用标准差(x±s)表示，采用t检验，计数资料以百分率（%）表示，采用x2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。
2.结果
2.1HPV-DNA检测结果
在本次研究的150例患者中，HPV检查的阳性率为22.67%（34/150）。经病理证实，宫颈上皮瘤变共有15例，占比44.12%，CINⅠ共有12例，占比35.29%，CINⅡ共有3例，占比8.82%，CINⅢ和宫颈癌各有2例，各自占比5.88%。见表1。
表1HPV-DNA检测结果[n(%)]

类型	n（例）	百分比（%）
宫颈上皮瘤变	15	44.12
CINⅠ	12	35.29
CINⅡ	3	8.82
CINⅢ	2	5.88
宫颈癌	2	5.88
总计	34	100.00

在34例HPV阳性患者中，共有11例（32.35%）分型检测结果为HPV-16，有7例（20.59%）分型检测结果为HPV-18，其他11种HPV病毒则合计有16例（47.06%）。在HPV病毒中，HPV-16和HPV-18的感染率要更高其它HPV病毒。见表2。
表2不同分型HPV病毒的感染率分布[n(%)]

类型	n（例）	百分比（%）
HPV-16	11	32.35
HPV-18	7	20.59
其他11种HPV病毒	16	47.06

3.讨论
宫颈癌是女性最常见的恶性肿瘤之一，主要起源于宫颈上皮细胞。宫颈癌的主要风险因素包括高危型HPV感染、性活跃、多个性伴侣、吸烟、免疫抑制等^[9]。多数宫颈癌为鳞状细胞癌，少数为腺癌，还有少见的其他亚型如腺鳞癌和小细胞癌等^[10]。宫颈癌病变则是指在宫颈组织中出现的异常细胞增生和结构改变，可能是宫颈癌的前期病变。近几十年来，宫颈细胞学检查在临床上得到广泛的应用，使得宫颈癌及癌前病变的早期检测与治疗成为可能。然而，目前国内除少数几个比较发达的城市及行业外，大多数地区都没有宫颈癌的筛查项目，大部分的宫颈癌患者都是在医院进行机会性筛查^[11]。另外，国内受过正规训练的细胞学专业人才严重缺乏，导致各医院子宫颈细胞学检测的专业程度存在较大差距，病理医生与细胞学技师的诊断水平存在较大差距；然而，目前国内尚未得到权威部门认可的液体细胞学试剂大量使用，且缺少完善的细胞学检查手段及质控体系，造成了许多不良现象^[12]。
与某些原因不明且难以有效防治的恶性肿瘤相比，目前宫颈癌的发病机制已基本明确，可进行严密的筛查。其实，宫颈癌是由高危HPV病毒长期感染引起的，经过10年左右的时间，可以逐步发展到宫颈上皮内瘤变、CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ，如果不能有效防治，将会发生宫颈癌^[13]。目前，国内对宫颈癌的筛查多采用“三阶梯”，即临床先做TCT，该方法操作简便，特异性高，能对相对典型的患者做出有效的诊断，但灵敏度不高，故需对TCT试验阴性的患者同时进行HPV-DNA检测和HPV分型^[14-15]。本研究中，TCT阴性患者150例中，其中34例为HPV-DNA阳性。鉴于不同亚型HPV的致瘤性存在较大差别，已有研究证实HPV-16、HPV-18型与宫颈癌的发生率高达90%以上，故临床需在HPV-DNA阳性的同时，进一步开展HPV型别检测，如发现HPV-16或HPV-18，则应加强对这一人群的筛查，并做阴道镜组织活检。
综上所述，宫颈病变和宫颈癌类似，都是由HPV病毒引起的病变，在临床上，对于子宫颈病变的患者，即便是细胞学结果为阴性，也要做好相关的筛查工作，对于这样的患者，还应该进行HPV分型和HPV-DNA阳性的检查，当HPV分型为HPV-16、HPV-18型时，患者需行阴道镜下活检术，多方法联用才能保证对宫颈癌的正确诊断，增强宫颈癌防治能力。
参考文献
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