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高危型人乳头瘤病毒检测在宫颈癌筛查中的应用价值分析
周娴   
 监利市人民医院   荆州  监利   433300
【摘要】目的：探讨针对高危型人乳头瘤病毒（HPV）检测对筛查宫颈癌疾病的价值。方法：选择门诊收治的113例行HPV-DNA采样标本并检测的患者为研究对象，通过直接采样方法获取宫颈表面的细胞样本，对样本进行液基细胞学检查（TCT）、高危型HPV检测以及宫颈活检检查，以宫颈活检检查的结果作为金标准进行结果的分析。结果：HPV感染例数48例，感染率42.48%，HPV阳性患者在平均年龄低于HPV阴性（t=6.391，P＜0.001）；TCT检查与高危型HPV检查结果显示，随着检查分级的提高，在HPV阳性率也提高（x²=8.125,7.451,P＜0.001）。病理结果为浸润癌、CINⅢ的患者在HPV与TCT检查上均是阳性，检出HPV阳性率为100%。CINⅡ、≤CINⅠ检出部分TCT阳性但是HPV阴性或者TCT阴性但是HPV阳性的情况。结论：高危型HPV检测对筛查宫颈癌疾病的价值突出。
【关键词】高危型人乳头瘤病毒；宫颈癌；筛查
 宫颈炎是全球范围内妇女面临的严重健康问题之一，造成宫颈癌的主要致病因素是人乳头瘤病毒（Human papillomavirus，HPV），其中高危型HPV是宫颈癌的重要致病因素，这些病毒感染与宫颈上皮细胞的异常增生和癌变密切相关^[1]。早期发现和治疗高危型HPV感染可以有效遏制宫颈癌的发生和发展^[2]。近年来，各国已经开始将高危型HPV检测技术应用于宫颈癌的筛查中。在某些国家和地区，已经逐渐形成了人群普查的检测机制，在筛查宫颈癌的同时，也同步进行高危型HPV检测，其应用价值受到了越来越多的关注^[3]。而在中国，虽然高危型HPV检测技术已经获得了广泛的应用，但在宫颈癌筛查中的应用还不够普遍^[4]。本研究讨高危型HPV检测在宫颈癌筛查中的应用价值，旨在为宫颈癌的预防和早期诊断提供新的思路和方法，报告如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
选取2023年1月-2023年10月医院妇科门诊收治的113份HPV-DNA采样标本为研究对象。标本选取病例对象一般资料为：年龄20～75岁，平均年龄（47.15±3.41）岁；体质量指数18～25kg/m²，平均（22.15±1.28）kg/m²。纳入标准：所有研究对象均是有性生活史；年龄在18周岁以上，拥有完整的资料；取样标本时候患者非月经期；患者知情同意。排除标准：合并子宫切除史的患者；合并急性生殖系统感染者；存在盆腔照射治疗史的患者。
1.2 方法
1.2.1 标本取样
采取直接取样的方式，主要是应用宫颈刷子或者扩展头子蘸取宫颈表面细胞样本，将采集获得的样本转移至试管待检。
1.2.2 液基细胞学检查（Thinprep cytologic test，TCT）
针对获取的标本组织，利用负压过滤法分离出标本中存在的杂质。将经过滤处理的上皮细胞制备为直径大小在20mm的薄层细胞制片，将制片置于载玻片上。用95%的酒精固定制片，并且予以巴氏染色以及封片处理，最后经显微镜下进行阅片。经显微镜下显示标本在非典型鳞状上皮（Atypical squamous epithelium，ASCUS）及其以上的病变则可判定为阳性。
1.2.3 高危型HPV检测
采用德国凯杰(QIAGEN)的非放射性HPV-DNA分析系统，通过应用第二代杂交捕获技术对高危型HPV病毒检测，具体包括HPV16、HPV18、HPV31、HPV33、HPV35、HPV39、HPV45、HPV51、HPV52、HPV58、HPV59、HPV68。若是检测标本相对荧光值/阳性定标域值（Relative fluorescence value/positive scaling domain value，RLU/CO）≥1.2就可以确诊属于HPV阳性。
1.2.4 宫颈活检
借助阴道镜这一检查工具，选择宫颈移行上皮伴碘试验以及醋酸白试验阳性部位的组织，对这一组织实施病理活检。活检的结果具体参照《乳腺和女性生殖器官肿瘤病理学和遗传学》^[5]标准分析。
1.3 观察指标
（1）比较应用TCT检查不同结果下的HPV感染情况；（2）分析不同病理诊断的HPV感染情况；（3）对比病理学、细胞学、高危型HPV检测的结果。
1.4 统计学分析
使用SPSS21.0软件做统计学结果分析，符合正态分布的计量资料用（）表示，组间比较应用方差分析，计数资料用（%）表示，使用x²检验，以P＜0.05表示差异有统计学意义。
2 结果
2.1 年龄与HPV感染
本次纳入的113例接受检测的患者，HPV感染48例，感染率为42.48%。HPV阳性患者的平均年龄均是低于HPV阴性患者，对比差异具有统计学意义（P＜0.05），见表1。
表1 年龄与HPV感染结果分析（）

HPV感染情况	例数	年龄（岁）
HPV阳性	48	34.12±4.36
HPV阴性	65	39.17±4.86
t		6.391
P		＜0.001

2.2 TCT检查的HPV感染情况
应用TCT检查的结果显示，随着细胞学诊断分级的逐渐提高，检查出HPV阳性率也越来越高，差异具有统计学意义（x²=8.125，P＜0.001），见表2。
表2 应用TCT检查患者HPV感染情况统计

TCT检查	例数	HPV阳性		HPV阴性
		例数	百分比（%）	例数	百分比（%）
正常+炎症	63	8	12.70	55	87.30
ASC-US	15	6	40.00	9	60.00
ASCUC-H	17	9	52.94	8	47.06
LSIL	11	8	72.73	3	27.27
HSIL	7	7	100.00	0	0

注：ASC-US表示非典型鳞状上皮细胞－不能明确意义；ASCUC-H表示非典型鳞状上皮细胞-不除外高度鳞状上皮细胞内病变；LSIL表示低度鳞状上皮内病变；HSIL表示高度鳞状上皮细胞内病变。
2.3 不同病理诊断的HPV感染情况
应用宫颈病理学的诊断方式，诊断病理的级别越高，在检出的HPV阳性率也越高，差异具有统计学意义（x²=7.451，P=0.002），见表3。
表3 不同病理诊断的HPV感染情况统计

宫颈活检病理诊断	例数	HPV阳性		HPV阴性
		例数	百分比（%）	例数	百分比（%）
正常+炎症	63	36	57.14	27	42.86
CINⅠ	20	13	65.00	7	35.00
CINⅡ	10	8	80.00	2	20.00
CINⅢ	10	10	100.00	0	0
浸润癌	6	6	100.00	0	0
湿疣	4	3	75.00	1	25.00

注：CINⅠ表示轻度宫颈不典型增生；CINⅡ表示中度宫颈不典型增生；CINⅢ表示重度宫颈不典型增生及宫颈原位癌。
2.4 不同检查方式的检测结果
在不同病变患者经不同检查方式检测下，病理结果为浸润癌、CINⅢ的患者在HPV与TCT检查上均是阳性，检出HPV阳性率为100%。而CINⅡ、≤CINⅠ检出部分TCT阳性但是HPV阴性或者TCT阴性但是HPV阳性的情况，详见表4。
表4 不同检查方式的检测结果统计

病理诊断	例数	HPV阳/TCT阳		HPV阴/TCT阳		HPV阳/TCT阴		HPV阴/TCT阴
		例数	%	例数	%	例数	%	例数	%
浸润癌	6	6	100.00	0	0	0	0	0	0
CINⅢ	10	10	100.00	0	0	0	0	0	0
CINⅡ	10	8	80.00	1	10.00	1	10.00	0	0
≤CINⅠ	87	44	50.57	24	27.59	11	12.64	8	9.20

3 讨论
宫颈癌的发生需要经历一定的阶段，而早期发现宫颈癌的关键优势是治疗的成功率较高。通过筛查，可以在癌变发展到严重阶段之前就进行治疗^[6]。此外，宫颈癌筛查也可以帮助区分是否需要进一步检查或治疗，减少了可能的焦虑和不必要的干预。宫颈癌的筛查宫颈细胞学检查（也称为“子宫颈涂片”）和宫颈HPV检测^[7]。宫颈细胞学检查通过收集宫颈细胞样本，然后在实验室中检查这些细胞是否有异常变化。宫颈HPV检测检测是否存在宫颈HPV感染，因为这种病毒是宫颈癌的主要原因之一。
在本次研究中，筛查出HPV感染48例，感染率为42.48%，而在筛查HPV感染者，显示HPV阳性者的平均年龄低于HPV阴性，这一结果说明HPV感染在年龄较低的群体有相对较高的发病率。年轻人的性活动增加了他们接触HPV的机会。此外，年轻人的免疫系统可能尚未完全成熟，使得他们更容易受到HPV感染。另外，一些行为因素，如早期性行为的开始、多个性伴侣、不使用安全性措施等，也增加了年轻人感染HPV的风险^[8]。本次研究中，经TCT检查发现，随着细胞学诊断分级的提高，在HPV阳性率也更高，而其中HSIL的HPV阳性率达到100%。HSIL是宫颈病变中比较严重的一种，它指的是高度鳞状上皮内病变，通常需要进一步的诊断和治疗，因为这种病变可能最终进展为宫颈癌。在这种情况下，宫颈细胞中的改变通常已经明显，这表明细胞进行了异常分裂和生长。当宫颈细胞受到HPV感染时，病毒DNA进入细胞并引起细胞的生长异常，从而导致宫颈上皮细胞出现各种病变。HSIL已经达到了培养皿中宫颈上皮细胞变异的最高程度，因此，对于诊断HSIL的宫颈细胞，几乎所有的情况下都会发现HPV感染^[9]。而病理诊断也显示对于诊断分级不同的受检者，在HPV阳性率也逐渐提高，其中CINⅢ与浸润癌的HPV阳性率达到100%。而相较于正常以及炎症，CINⅠ、CINⅡ在HPV阳性率的占比也较高，主要是对于病理分级在CINⅠ的患者，因为HPV的感染，可引起细胞形态以及细胞结构的异常，异常病理变化具有逆转的可能，比如机体在经药物或者其他因素使得具体抵抗力增强后，发生的HPV感染也可以被机体中的免疫细胞杀灭，使得机体恢复到正常状态。而在CINⅡ及以上，因为HPV感染的繁殖及扩散，依靠自身免疫细胞清除难度较大，随着病情持续进展就可演变成宫颈癌^[10]。本次研究也对TCT、高危型HPV检测的情况进行分析，显示对于浸润癌与CINⅢ经不同检查的方式，均是检出100%的阳性，而随着病理分级的下降，在检测方式中也出现检查方式部分阴性的情况。由此可见在TCT检查与高危型HPV检测的方式，对于筛查宫颈癌均是有一定的作用，针对病理分级高的病变应用不同方式均是可以判定，但是在未明确病变情况的时候，可以采取联合检测的方式，早期识别出宫颈癌相关病变，为疾病的早期治疗干预提供有利帮助。
综上所述，针对宫颈癌疾病，在疾病的大规模筛查工作中，通过高危型HPV检测方式观察HPV阳性情况，识别宫颈癌病变，而在实际的检查过程中，采取液基薄层细胞检测与高危型HPV检测相联合方式可以获得较高的诊断结果，如此为疾病的早期治疗干预提供有利帮助。 
【参考文献】
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作者简介：周娴  出生年月:1981.12.24  性别：女 民族：汉 籍贯：荆州监利 所在单位：监利市人民医院  科室：检验科  毕业院校：湖北医药学院  职称：主管技师  学历:本科  研究方向:HPV宫颈癌筛查  通讯地址： 湖北省荆州市监利市人信城  邮编：433300   邮箱：39091654@qq.com