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化学发光免疫分析仪检测乙肝五项的性能研究
刘蕾
临沂市精神卫生中心检验科  山东  临沂  276000
【摘要】目的：研究全自动光激化学发光仪检测乙肝五项的性能。方法：遵循行业所制定的标准和规范文件，对全自动光激化学发光仪在乙肝五项中的精密度、临界值分析物浓度的重复性以及准确度等性能进行了系统的评估。结果：仪器两个模块检测的HBCAb、HBeAb及HBeAg临界值样本阴性及阳性符合率均在95.00%以上，通过验证。以临床检验中心的室间质量评价活动为基础，在这次评价中，总符合率为100%。乙肝五项指标在全自动光激化学发光仪的两个模块检测中，与其室间质量评价反馈结果相一致。结论：化学发光免疫分析仪在乙型五项的检测中具有较高的准确度，可以运用在标本的常规检测。
【关键词】乙肝五项；全自动光激化学发光仪；符合率
[Abstract] Objective: To study the performance of automatic photoactivation chemiluminescence instrument for detecting hepatitis B penta. Methods: The precision, repeatability and accuracy of the critical analyte concentration of the automatic photoactivated luminescence instrument were evaluated systematically according to the standards and specification documents formulated by the industry. Results: The negative and positive coincidence rates of HBCAb, HBeAb and HBeAg critical value samples detected by the two modules were all above 95.00%, which passed the verification. Based on the inter-laboratory quality evaluation activities of clinical laboratory center, the total coincidence rate in this evaluation was 100%. The five indexes of hepatitis B were detected in two modules of the automatic photoactivated luminescence instrument, and the feedback results were consistent with the quality evaluation of the room. Conclusion: Chemiluminescence immunoassay has a high accuracy in the detection of type B pentadiene and can be used in the routine detection of specimens.
[Key words] hepatitis B five items; automatic light excitation chemiluminescence instrument; compliance rate
乙型肝炎病毒（HBV）是一种引起肝炎的病毒，HBV感染引起的疾病范围广泛，从无症状感染到慢性肝炎、肝硬化，甚至肝癌等^[1]。乙型肝炎病毒感染的检测方法：HBsAg（乙肝表面抗原）检测：乙型肝炎病毒感染的最早指标，阳性表明病毒感染存在^[2]。抗-HBc IgM（乙肝核心抗体IgM）检测：检测乙型肝炎病毒急性感染，主要用于早期诊断。抗-HBs（乙肝表面抗体）检测：检测曾经感染过HBV，或者已接种乙肝疫苗的人。HBV核心抗体IgG（抗-HBc IgG）检测：用于判断曾经或正在患有慢性感染。HBeAg（乙肝e抗原）检测：表示病毒复制活跃，传染性较强；阴性则表明病毒复制减弱。抗-HBe（乙肝e抗体）检测：阳性表明病毒复制减弱，病情稳定。抗-HBV抗原抗体系统（IgG、IgM）检测：可以帮助判断患者的感染类型和疾病进展^[3]。
1检测系统与数据分析
1.1仪器与试剂
全自动光激化学发光仪的运用显著减少了实验过程中的操作复杂性，提高了实验效率。在实验过程中，使用模块一和模块二各自的序列号，以及分析仪所采用的HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb以及HBcAb试剂。为确保实验准确性，仅选用了在其有效使用期内的试剂和标准物质，以保障实验结果的可靠性。
1.2样本
本次所选择的样本为我院检验科在2022年7月到2023年7月进行的50例乙肝五项检测的患者，同期选择50例健康体检者，血清学样本总共100份。
1.3方法
日常对设备进行维护保养的操作是必不可少的，以确保其稳定运行和可靠性。在维护过程中，使用制造商提供的检测试剂盒和定标溶液，用于对HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb以及HBcAb等项目进行精确的校准。当定标完成后，进行质控检测，以验证仪器的准确性和稳定性。在实验室内部，在规定的控制范围内进行质量控制，这一流程的落实对于保证实验数据的可信度至关重要。
1.3.1精密度验证
（1）实验指标。进行精密度验证，目标项目为HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb和HBcAb。
（2）验证设计。在验证过程中，选择患者血清标本作为验证材料。对于HBsAg，使用了低、中、高三个浓度的阳性样本；对于HBsAb，则采用了阴性样本以及低、中浓度的阳性样本；而HBeAg、HBeAb和HBcAb的验证，选用了阴性样本和弱阳性样本。每天连续进行1批次的分析，每个浓度的样本会重复测定4次，持续5天。
（3）数据分析与判定。采用EP Evaluator软件中的Complex Precision模块来评估数据。将批内标准差和总标准差与制造商的声明进行比较。如果计算得到的批内标准差小于等于制造商声明的批内标准差验证值，这意味着批内精密度与制造商声明一致。只有在这些条件下，才会认定验证通过。
1.3.2临界值分析物浓度重复性试验
（1）试验内容。进行临界值分析物浓度的重复性实验，针对的分析项目包括HBeAg、HBeAb和HBcAb。
（2）实验设计。在实验方案中，准备了处于临界值上下20%浓度范围内的HBeAg、HBeAb以及HBcAb样本，每份样本进行20次重复检测。
（3）数据统计与判定标准。通过对临界值上下浓度范围内的样本进行重复检测，分别计算阳性率和阴性率，其中阳性率基于浓度范围内的阴性、阳性样本分布，形成“95%区间”。如果在临界值上浓度范围内的样本检测结果阳性率达到或超过95%，同时，临界值下浓度范围内的样本检测结果阴性率也达到或超过95%，那么可以确定该浓度范围位于“95%区间”内。在这种情况下，临界值±20%的样本可以通过这一方法获得一致的检测结果。
1.3.3室间质评阴阳性符合率
（1）实施方案。进行了针对2020年至2022年期间临床检验中心间质量评价的数据统计工作。通过对这些回报结果的分析，计算了实验室的阴阳性符合率和总符合率。
（2）结果评判标准。在结果判定方面，设定了阳性符合率、阴性符合率以及总符合率的阈值，分别要求阳性符合率不低于95%、阴性符合率不低于95%，或者总符合率不低于95%，方可被视为达到可接受的质量水平。计算这些率的具体方式如下所示：

在上述公式中，a代表实验室结果与标准结果均为阳性（+）的情况；b代表实验室结果为阳性（+），标准结果为阴性（一）的情况；c代表实验室结果为阴性（一），标准结果为阳性（+）的情况；d代表实验室结果与标准结果均为阴性（一）的情况。
2结果
2.1精密度验证
利用全自动光激化学发光仪中的两个模块，针对乙肝五项指标进行了批内标准差和总标准差的验证工作。成功证实了各个水平下的批内标准差和总标准差均远小于厂家声明的标准差，如下表1所示。
表1乙肝五项的精密度验证结果

项目	水平	结果		厂家声明
		批内标准差	总标准差	批内标准差	总标准差
HBcAb	低值	0.01	0.02	0.03	0.03
	中值	0.25	0.27	0.90	0.89
HBeAb	低值	0.07	0.09	0.22	0.23
	中值	0.89	0.92	3.64	3.57
HBeAg	低值	0.02	0.03	0.05	0.06
	中值	0.89	0.92	3.64	3.57
HBsAb	低值	0.16	0.18	0.21	0.21
	中值	1.20	1.52	3.25	3.34
	高值	1.20	1.52	3.25	3.34
HBsAg	低值	0.02	0.05	0.05	0.06
	中值	1.67	2.18	3.11	3.22
	高值	7.27	10.29	13.68	14.53

2.2临界值分析物浓度重复性试验
该仪器两个模块检测的HBcAb、HBeAb及HBeAg临界值样本阴性及阳性率均在95.00%以上，通过验证，如下表2所示。
表2临界值验证结果

项目	模块	95%区间	临界值+20%浓度样本阳性率（%）	临界值-20%浓度样本阳性率（%）	结论
HBcAb	模块一	0.75-1.11	100.00	100.00	通过
	模块二	0.75-1.15	100.00	100.00	通过
HBeAb	模块一	0.82-1.29	100.00	100.00	通过
	模块二	0.88-1.18	100.00	95.00	通过
HBeAg	模块一	0.85-1.17	100.00	100.00	通过
	模块二	0.86-1.15	95.00	100.00	通过

2.3卫生部和山东省室间质评阴性和阳性符合率
以临床检验中心的室间质量评价活动为基础，在这次评价中，总符合率为100%。乙肝五项指标在全自动光激化学发光仪的两个模块检测中和国家标准结果相一致。
3讨论
乙型肝炎作为一种普遍存在的临床传染病，其乙肝五项检测方案已成为常见的临床诊断策略。为保障检测系统的精确性，为临床提供可信赖的检验结果，先前的研究已经对酶联免疫吸附试验在乙肝五项检测中的性能进行了优化和改良。基于这一基础，参考了相关行业指南和标准，以全自动光激化学发光仪为分析平台，对乙肝五项定量检测分析性能进行了深入而全面的评价。
利用全自动光激化学发光仪中的两个模块，针对乙肝五项指标进行了批内标准差和总标准差的验证工作，成功证实了各个水平下的批内标准差和总标准差均远小于厂家声明的标准差。这表明该仪器在测试乙肝五项指标时，具有较小的测量误差。造成这种结果的原因可能是仪器的设计与制造采用了高精度的技术，使其能够稳定地提供精确的检测结果。同时，样本的处理和仪器操作也可能对结果的准确性产生积极影响。该仪器两个模块检测的HBCAb、HBeAb及HBeAg临界值样本阴性及阳性率均在95.00%以上，通过验证。这可能是因为仪器的精密度和稳定性使得其能够在不同浓度下保持较高的一致性。此外，仪器的灵敏度和样本处理技术也可能对结果的稳定性产生积极影响。以临床检验中心的室间质量评价活动为基础，在这次评价中，总符合率为100%。乙肝五项指标在全自动光激化学发光仪的两个模块检测中，与其室间质量评价反馈结果相一致。这可能是因为仪器的校准和标准化使得其能够在不同实验环境下保持高度的稳定性和准确性，同时，操作规范和样本处理的一致性也可能对结果的一致性产生积极影响。
参考文献
[1] 吴园.酶联免疫吸附法与金标快速检测板法检测乙肝五项血清标志物的价值[J].医疗装备,2023,36(14):88-89+92.
[2] 王娜娜,王婷婷.化学发光法与酶联免疫吸附试验在乙型肝炎病毒血清学检验中的应用[J].实用检验医师杂志,2022,14(01):13-16.
[3] 姜富国,李帅,杨思伟等.慢性乙型病毒性肝炎产妇乙肝病毒载量与母乳喂养后婴儿乙肝标志物的相关性研究[J].临床医学工程,2023,30(05):731-732.